Bio-Rad_iCycleriQ荧光定量PCR仪作为一种常用的分子生物学工具,近年来在基因表达分析领域发挥了举足轻重的作用。基因表达是生物体基因功能的重要体现,通过研究基因表达水平的变化,科研人员能够深入了解基因在生物体中的作用以及与疾病的相关性。
Bio-Rad_iCycleriQ荧光定量PCR仪正是满足这一需求的有效工具。
荧光定量PCR技术,是在传统的PCR基础上,通过加入荧光基团,实时监测PCR扩增过程中的荧光信号强度,从而实现对特定基因表达量的定量分析。该技术具有高度敏感、特异性和准确性,已成为基因表达分析的金标准方法。
基因表达分析中的应用
1.目标基因表达量的绝对定量
可以对目标基因的表达量进行绝对定量,即计算出特定基因在样本中的拷贝数。这对于研究基因功能、了解基因在生物体中的作用具有重要意义。例如,在疾病研究中,通过比较正常组织和病变组织中目标基因的表达量,可以揭示基因与疾病之间的关系。
2.目标基因表达量的相对定量
还可以对目标基因的表达量进行相对定量,即比较不同样本中目标基因的表达水平。这种方法通常采用内参基因(housekeepinggene)作为参照,以消除不同样本间RNA提取质量、反转录效率等因素的影响。相对定量方法在诸如疾病诊断、药物筛选等领域具有广泛应用。
3.基因差异表达分析
可以用于检测基因在不同条件下(如不同处理组、疾病与正常对照等)的差异表达。通过对实验组和对照组进行比较,可以筛选出差异表达基因,为后续的研究提供目标基因。这种方法在功能基因组学、药物研发等领域具有重要价值。